離心機(jī)是一種用于根據(jù)混合物的大小,密度,介質(zhì)的粘度和轉(zhuǎn)子速度來分離混合物組分的設(shè)備,通常用于實(shí)驗(yàn)室從粗提物中分離生物分子,在離心機(jī)中,將樣品保存在繞固定點(diǎn)(軸)旋轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)子中,從而產(chǎn)生垂直于該軸的強(qiáng)力,分離不同分子的離心機(jī)類型不同,但是它們都遵循沉降原理。離心是一種分離成分的技術(shù),其中離心力加速度使密度較大的分子向外圍移動,而密度較小的粒子向中心移動。
離心過程取決于樣品繞固定點(diǎn)旋轉(zhuǎn)時產(chǎn)生的垂直力。離心速度取決于溶液中存在的顆粒的大小和密度。相對離心力(RCF)相對離心力是不同類型和尺寸的轉(zhuǎn)子強(qiáng)度的度量,這是由于旋轉(zhuǎn)而施加在轉(zhuǎn)子內(nèi)容物上的力,RCF是始終相對于地球重力作用在樣品上的垂直力,可以將不同離心機(jī)的RCF用于轉(zhuǎn)子比較,從而可以針對特定功能選擇適用的離心機(jī)。
計算相對離心力(RCF)的公式可以寫為:
RCF(g力)= 1.118×10 -5 ×r×(RPM)2
其中r是轉(zhuǎn)子的半徑(以厘米為單位),RPM是轉(zhuǎn)子每分鐘的旋轉(zhuǎn)速度。
離心轉(zhuǎn)子,離心機(jī)中的轉(zhuǎn)子是裝有試管的電機(jī)設(shè)備。DT5-2B臺式低速離心機(jī)的轉(zhuǎn)子被設(shè)計為產(chǎn)生可導(dǎo)致樣品中成分分離的轉(zhuǎn)速。離心機(jī)中使用的轉(zhuǎn)子主要有二種,分別是:角轉(zhuǎn)子,這些轉(zhuǎn)子將樣品管相對于轉(zhuǎn)子的軸線成45°角,在這種類型的轉(zhuǎn)子中,顆粒撞擊到管子的另一側(cè),在此處顆粒終向下滑動并收集在底部,隨著管子路徑長度的增加,它們比其他類型的轉(zhuǎn)子要快,但是,由于力的方向與管的位置不同,因此一些顆??赡軙埩粼诠艿膫?cè)面。水平轉(zhuǎn)子,當(dāng)離心過程開始時,擺動的斗形轉(zhuǎn)子將管子以90°的角度保持住。在該轉(zhuǎn)子中,管子懸掛在架子上,從而使管子足夠移動以獲取水平位置。在這種類型的轉(zhuǎn)子中,顆粒沿著力的方向或路徑存在,該力允許顆粒從轉(zhuǎn)子朝著管的底部移動離開轉(zhuǎn)子,由于試管保持水平,因此上清液保持為平坦表面,使沉積的顆粒與上清液分離。
臺式離心機(jī)是緊湊型離心機(jī),通常在臨床和研究實(shí)驗(yàn)室中使用。它由電動馬達(dá)驅(qū)動,其中管子繞固定軸旋轉(zhuǎn),從而產(chǎn)生垂直于管子的力。因?yàn)樗鼈兎浅>o湊,所以它們在空間較小的小型實(shí)驗(yàn)室中很有用。臺式離心機(jī)有各種不同的用途,可用于各種目的。臺式離心機(jī)具有一個轉(zhuǎn)子,該轉(zhuǎn)子帶有用于樣品管的支架和一個用于封閉離心機(jī)工作單元的蓋。
分析離心是一種分離方法,其中樣品中的顆粒根據(jù)其密度和所經(jīng)歷的離心力進(jìn)行分離。分析超速離心(AUC)是一種用于定量分析溶液中大分子的通用且可靠的方法。分析離心是基于這樣的原理,即比其他顆粒致密的顆粒沉降更快。同樣,較大的分子在離心力作用下比較小的分子運(yùn)動更快。用于確定大分子的相對分子質(zhì)量的分析超離心可以通過沉降速度方法或沉降平衡方法進(jìn)行,大分子的水動力特性由其沉降系數(shù)來描述。它們可以根據(jù)特定生物分子的濃度邊界在重力場中移動的速率來確定,沉降系數(shù)可用于表征隨著實(shí)驗(yàn)條件的變化大分子的尺寸和形狀的變化,三種光學(xué)系統(tǒng)可用于分析型超速離心機(jī)(吸光度,干涉和熒光),可以實(shí)時選擇性的觀察沉淀。
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